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實(shí)驗(yàn)室一般都是用些什么離心機(jī)?
信息來源: 湘銳離心機(jī) 發(fā)布時(shí)間:2022-04-25 閱讀:347
實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)一般都是用于實(shí)驗(yàn)分析或者樣品制備等。
其原理都是一樣的,都是利用離心力進(jìn)行過濾分離或者血清分離。那么如何完成分離、濃縮機(jī)提取方法制備,
1.醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室離心技術(shù)的選擇
根據(jù)相對離心力(RCF)的上限及其主要應(yīng)用,醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室常用的離心機(jī)大致可分為四類:低速離心機(jī)、通用離心機(jī)、高速離心機(jī)和超高速離心機(jī)。
1.1離心機(jī)的選擇
(1)低速離心機(jī)。Rcf≤7000g;細(xì)胞或細(xì)胞碎片的沉淀分離、過濾、滲析、親和柱凈化;大容量(4ー12l)型常用于血站或血庫實(shí)驗(yàn)室。
(2)通用離心機(jī)。RCF≤30 000克;除了低速功能外,還具有核酸、蛋白質(zhì)、質(zhì)粒提取等一些高速功能。
(3)高速通過離心機(jī)。RCF≤100 000 g;核酸、蛋白及基因質(zhì)粒進(jìn)行提取;兼顧亞細(xì)胞組織結(jié)構(gòu)和病毒可以分離;密度不同梯度條件下離心。PSB200實(shí)驗(yàn)室使用離心機(jī).jpg
(4)超速離心機(jī)。RCF1 050 000 g;經(jīng)核酸純化的氯化銫;亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)、細(xì)胞器、病毒和脂蛋白的分離;密度梯度離心法
1.2常用離心參數(shù)
(1)離心機(jī)速度。轉(zhuǎn)子通過離心驅(qū)動(dòng)系統(tǒng)旋轉(zhuǎn)的速度,單位為每分鐘轉(zhuǎn)數(shù)(每分鐘轉(zhuǎn)數(shù))(r/min)。
(2)相對離心力。當(dāng)一個(gè)物體在給定的角速度處作圓周運(yùn)動(dòng)時(shí),其軸向運(yùn)動(dòng)產(chǎn)生離心力f=ω
2 r.但是離心力要克服垂直于它的地球引力和樣品粒子的摩擦力。
和浮力產(chǎn)生影響(后兩者可忽略不計(jì)),故以RCF表示,RCF=ω2 r/980,等于在離心場中作用于學(xué)生樣本進(jìn)行粒子上的離心力作用相當(dāng)于一個(gè)地球自身重力的倍數(shù),單位是重力以及加速度g(1 g=980 cm/s 2),RCF1000×g則是由于重力方向加速度的1000倍。RCF的大小與離心處理速度及在離心收集容器中粒子距心軸的路徑(實(shí)際使用離心運(yùn)動(dòng)半徑)有關(guān),即RCF=1.12r(RPM/1000)2,故有中國最大、平均和最小RCF之分。樣品分析粒子系統(tǒng)能否能夠得到發(fā)展有效方法分離技術(shù)主要問題取決于RCF,文獻(xiàn)研究中常需要給出自己最大RCF為離心時(shí)間條件。轉(zhuǎn)頭額定工作轉(zhuǎn)速所對應(yīng)的RCF可以同時(shí)通過采用離心半徑-RCF-RPM曲線關(guān)系換算,但精確RCF值應(yīng)查找生產(chǎn)廠轉(zhuǎn)頭參數(shù)表。
(3)沉降系數(shù)(沉降系數(shù),S)。它是樣品粒子的一個(gè)重要的理化參數(shù)。Svedbergs值(S值=10-13s)代表相應(yīng)的離心力樣品顆粒的沉降速率。不同S值的離心時(shí)間(完全沉降到容器底部)的表達(dá)式為t=1/S
常見分離生物樣本的
(4)K因子值。它反映了離心轉(zhuǎn)子的效率,它與轉(zhuǎn)子的尺寸、材料和速度有關(guān)。K值可以用來估算S值樣品顆粒的沉降時(shí)間:T=K/S,K值越小,紡絲效率越高,沉降時(shí)間越短[5]。
2醫(yī)學(xué)研究實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)的離心處理技術(shù)
根據(jù)離心力與被離心物質(zhì)的相互作用,可分為差速離心和密度梯度離心。
2.1差速離心
差速離心是利用進(jìn)行離心處理樣本主要組分中不同地區(qū)沉降影響系數(shù)以及粒子的沉降發(fā)展速度明顯差別(如各細(xì)胞活性組分),經(jīng)一定增長速度、一定社會(huì)離心力及一定工作時(shí)間通過離心力,先后出現(xiàn)沉降而得到有效分離。在此研究過程中存在樣本企業(yè)往往被分離為沉淀物和上清液兩部分,其前提是待分離的兩種或數(shù)種粒子的S值的差值沒有足夠使用離心樣品S值RCF(g)RPM(r/min)細(xì)胞~10 7>200>1500細(xì)胞核4×10 6~10 7 600~800 3000
細(xì)菌,線粒體210 4~710 4 7000 7000微粒體
50~110410000~100000010000~30 000病毒,DNA10~1200~100 000~30 000 RNA4~501000000~40000000000~60 000蛋白質(zhì)2~25400000000000
差速離心離心沉淀時(shí)間短,壁效應(yīng)最小,且沉淀物長時(shí)間附著在管壁上
差速區(qū)離心通道長度不合適,離心通道長度短于長時(shí)區(qū)
離心時(shí)間最長,離心時(shí)間最短
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