超速離心機的離心方法有哪些?
信息來源: 湘銳離心機 發布時間:2019-01-05 閱讀:1006
高速冷凍離心機一般在常壓空氣中旋轉,具有大功率驅動電機和制冷壓縮機。今天湘銳離心機和大家講講有關于超速離心機的離心方法有哪些?超速離心機的離心方法是什么?
一、差速離心
這種方法是選擇不同轉速的離心,分別分離各個不同組分。例如先用低速沉降大顆粒和上清液,在高速離心上清沉降中等顆粒,**超速離心上清沉降小顆粒。采用逐比較提高離心力分離上情液的方法,把不同大小的顆粒分開。這種方法比較簡單、方便,分離的組份沉到管底,因此可以迅速濃縮所要的組份,減少體積。但回收率和純度是有矛盾的,要提高回收率,勢必提高轉速或延長離心時間,這樣大小相近的顆粒也會沉到管底,因此該法多用于粗提純或初步濃縮樣品。
二、速度區帶(或速度梯度)離心
本法是將樣品放在一個連續的密度梯度液體上,通過離心,大顆粒沉降快,小顆粒沉降慢。經過一段時間,相同的顆粒就在同一深度形成一條帶子,因此把各種組份分開來。它適用于分離密度相同、而大小不同的物質,如不同的蛋白質組份密度都差不多,但分子量不一樣,用本法很容易將其分開。但對密度不同、大小類似的物質則不易分離。蔗糖梯度是一種常用的介質。用不同濃度的蔗糖溶液(5%-60%)配成梯度,用于梯度離心,再分別進行收集處于不同區帶里的各個組份。
三、沉降平衡離心
這是靜力學的方法,在離心管中形成一個液體梯度,在離心時各組份以不同的速度下沉,但最終停留在與自己相同的密度中,形成一條狹窄的平衡帶,并保持相對的穩定。為了使樣品所有組份都能達到它們的平衡位置,需要長時間離心。這種方法適用于分離大小相似但密度不同的物質,如核酸的分離。氯化銫梯度是常用于平衡離心的介質,分辨率很高,可區別密度相差0.05的組分,但離心時間需十幾到幾十小時,且價格很貴。已有一種商品名叫"Percoll"的聚蔗糖溶液可以代替氯化銫梯度。該介質能迅速形成梯度,使離心時間大大縮短到1-2h而仍有很好的分離效果。并且有配套的標記珠(Densitymarkerbeads)可以測定樣品的密度。
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